本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，微孔板载体固定人α1微球蛋白/bikunin前体（AMBP）特异性捕获抗体，加入待测样本与标准品后，其中的AMBP抗原与固相抗体特异性免疫结合，洗涤去除未结合杂质后，加入辣根过氧化物酶标记的AMBP检测抗体，构建完整夹心免疫复合物，经洗涤纯化后显色、终止反应，检测吸光度值即可定量测定样本中AMBP的含量。
基本参数：
产品名称：人α1微球蛋白/bikunin前体(AMBP)ELISA试剂盒
英文名称：AMBP Elisa Kit
货号：Y-E3125
规格：48T/96T
1.灵敏度：检出下限≤1.2ng/mL
2.检测范围：2.5ng/mL - 80ng/mL
3.反应时间：抗原结合 92min，酶标抗体 50min，显色 21min
4.显色系统：HRP 介导双组分 TMB 显色
5.检测波长：450nm，参比 600nm
6.特异性：针对 AMBP 前体全长蛋白，不单独识别 α1-MG 单链片段
7.重复性：批内 CV≤7.8%，批间 CV≤11.2%
8.注意事项：底物液出现蓝色即失效，必须直接更换新显色液
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
1. 试剂盒组分室温平衡 25min，稀释浓缩洗涤液，冻干标准品复溶后梯度稀释分装待用。
2. 酶标板标记孔位，标准品孔加入梯度标准品 50μL，待测样本孔加入预处理样本 50μL，空白孔空置。
3. 除去空白孔，其余每孔加入酶偶联试剂 100μL，封板密封，前后晃动酶标板混匀。
4. 37℃避光孵育 48min，避免光照直射反应板。
5. 揭膜倒液，洗涤液浸泡 25s 后拍干，连续洗板 4 次，滤纸吸干板底多余水分。
6. 避光加入显色底物 A、B 各 50μL，混匀后 37℃避光显色 18min。
7. 终止液终止显色，酶标仪测定吸光值，对照标准曲线得出 AMBP 前体蛋白浓度。
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