人α2纤溶酶抑制物(α2-PI)ELISA试剂盒

本试剂盒基于经典双抗体夹心ELISA技术，微孔板表面固定人α2纤溶酶抑制物（α2-PI）特异性捕获抗体，样本中的α2-PI抗原与固相抗体特异性免疫结合，洗板去除未结合物质后，加入HRP标记的检测抗体构建夹心免疫结构，洗涤纯化后进行酶促显色反应，终止反应后检测吸光度，吸光度数值直接对应样本中α2-PI的浓度水平，可精准定量。
基本参数‌：

产品名称：人α2纤溶酶抑制物(α2-PI)ELISA试剂盒

英文名称：α2-PI ELISA Kit
货号：Y-E2658

规格：48T/96T

1.灵敏度：最低可测≤4.5ng/mL

2.检测范围：9ng/mL - 288ng/mL

3.反应时间：样本温育 82min，酶结合物 46min，显色 18min

4.显色系统：一体式即用 TMB 显色底物

5.检测波长：450nm

6.特异性：靶向 α2-PI 天然构象，与 α2-AP 无同源交叉识别

7.重复性：板内 CV＜7.1%，板间 CV＜9.4%

8.注意事项：洗涤液配制严格按照说明书比例稀释，浓度偏差影响结合效率
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

1. 所有试剂常温放置 33min 平衡温度，稀释洗涤液，冻干标准品复溶后梯度稀释，样本低速离心备用。

2. 排布空白、标准、样本三类检测孔，标准孔加梯度标准品 50μL，样本孔加上清待测液 50μL，空白孔不加样。

3. 除空白孔外每孔加入酶标记二抗工作液 100μL，封板膜严密封板，水平摇晃混匀。

4. 37℃密闭孵育 72min，全程避光操作防止底物失活。

5. 撕去封板膜，弃液后洗涤液浸泡 34s 拍干，重复洗板 6 次，清除非特异性吸附杂质。

6. 避光加入显色底物 A、B 各 50μL，混匀后 37℃避光显色 13min。

7. 滴加终止液终止显色，15min 内完成酶标仪读数，换算标准曲线得到 α2-PI 检测结果。
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