本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附技术原理,固相酶标板包被人大肠癌专一抗原2特异性抗体,样本中的CCSA-2抗原与固相抗体特异性结合,孵育洗涤后加入酶标记配对检测抗体,形成特异性免疫夹心复合物,酶促底物显色后终止反应,通过吸光度值对照标准曲线,定量检测样本中CCSA-2的表达浓度。
基本参数:

产品名称:人大肠癌专一抗原2(CCSA-2)ELISA试剂盒
英文名称:CCSA-2 Elisa Kit
货号:Y-E227
规格:48T/96T
灵敏度:最低检出 1.8U/mL
检测范围:5U/mL - 200U/mL
反应时间:一抗孵育 85min,酶标二抗 45min,显色 19min,合计 149min
显色系统:即用型 TMB 显色液,终止液为稀硫酸溶液
检测波长:450nm,参考 620nm
特异性:对大肠来源 CCSA-2 高度特异,与 CEA 轻度交叉<4%
重复性:板内 CV<7.4%,板间 CV<8.7%
注意事项:黄疸、重度溶血样本不可用于检测,标准品梯度稀释严格按照说明书倍数操作
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

全部试剂室温静置 35min,稀释浓缩洗涤液,划分酶标板标准孔、样本孔、空白孔。
CCSA-2 梯度标准品每孔加 50μL,血清待测样本稀释后上样 50μL,空白孔加入缓冲稀释液。
各微孔加入 HRP 酶标记抗体工作液 100μL,封板密封,震荡混匀 20s。
37℃恒温孵育 62min,避光环境下进行免疫结合反应。
洗板 5 轮,每轮加满洗涤液浸泡 40s,倒扣甩干废液并拍干微孔。
避光添加显色液 A、B 各 50μL,混匀后 37℃避光显色 17min。
终止液终止显色,15min 内 450nm 测 OD 值,标准曲线计算 CCSA-2 抗原含量。
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