本试剂盒运用双抗体夹心ELISA检测原理,微孔板预先包被人大肠癌专一抗原3特异性捕获抗体,待测样本、标准品中的CCSA-3抗原可与抗体特异性结合,洗去多余杂质后加入酶标记检测抗体,形成完整免疫复合物,催化底物显色并终止反应,通过酶标仪读数结合标准曲线,定量测定样本中CCSA-3的含量。
基本参数:

产品名称:人大肠癌专一抗原3(CCSA-3)ELISA试剂盒
英文名称:CCSA-3 Elisa Kit
货号:Y-E226
规格:48T/96T
灵敏度:检出限 2.2U/mL
检测范围:6U/mL - 240U/mL
反应时间:样本结合 68min,二抗 38min,避光显色 17min,总 123min
显色系统:A+B 混合配制 TMB 显色液
检测波长:450nm
特异性:主要识别肠癌组织分泌 CCSA-3,胃肿瘤抗原无明显交叉
重复性:板内 CV<7.1%,板间 CV<8.4%
注意事项:未使用的微孔板条装入密封袋加干燥剂冷藏保存,不可冷冻试剂盒主体试剂
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

试剂盒室温复温 30min,配置洗涤工作液,拆分酶标板,多余板条密封低温存放。
梯度配制 CCSA-3 标准品并每孔加液 50μL,临床血清样本稀释后加入样本孔 50μL,空白孔补稀释液。
全部孔位加入酶偶联检测抗体 100μL,覆膜封板,横向摇晃酶标板混匀。
37℃避光孵育 58min,孵育过程中禁止开启孵育箱频繁开盖。
洗板 4 次,每次浸泡 30s,弃净液体后充分拍干微孔内部水分。
避光依次加显色 A、B 液各 50μL,轻柔混匀,室温避光显色 19min。
加入终止液终止酶促反应,酶标仪 450nm 读取吸光度,换算样本 CCSA-3 浓度。
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