本试剂盒采用间接ELISA检测原理,酶标板固相包被人单纯疱疹病毒Ⅰ型特异性抗原,待测样本中的HSVⅠ抗体与固相抗原特异性免疫结合,洗除未结合物质后,加入酶标记抗人抗体,形成抗原-待测抗体-酶标二抗复合结构,底物显色终止后检测吸光度,依据标准曲线定量检测样本中HSVⅠ抗体的含量。
基本参数:

产品名称:人单纯疱疹病毒Ⅰ型抗体(HSVⅠAb)ELISA试剂盒
英文名称:HSVⅠAb Elisa Kit
货号:Y-E750
规格:48T/96T
灵敏度:最低阳性检出滴度 1:8
检测范围:1:10 ~ 1:320 抗体滴度区间
反应时间:样本孵育 65min,酶标二抗 36min,显色 14min,总 115min
显色系统:A、B 液混合 TMB 显色
检测波长:450nm
特异性:仅识别 HSV-Ⅰ 型抗体,与 HSV-Ⅱ 交叉反应<3%
重复性:板内 CV<7.3%,板间 CV<8.5%
注意事项:阴性对照、阳性对照必须同步加样,实验废弃物按感染性标本处置
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

试剂盒室温平衡 29min,配制 1 倍洗涤工作液,取用对应数量包被板条,标记样本孔与对照孔。
HSVⅠAb 阳性标准品梯度稀释后每孔加 50μL,待测血清样本稀释上样 50μL,空白孔添加稀释液。
各微孔加入酶标记抗人抗体工作液 100μL,封板封口,轻摇混匀微孔体系。
37℃避光孵育 46min,板条水平放置避免液体侧漏。
手动洗板 5 次,每次浸润 36s,甩干废液后拍除孔底残留液体。
避光加入显色 A、B 液各 50μL,混匀后 37℃避光显色 12min。
滴加终止液终止反应,酶标仪 450nm 读数,对照标准曲线判定 HSVⅠ 型抗体含量。
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