本试剂盒运用间接酶联免疫吸附原理,微孔板预先包被单纯疱疹病毒Ⅱ型特异性抗原,样本中的HSVⅡ抗体可与固相抗原特异性结合,洗涤去除游离杂质后,加入辣根过氧化物酶标记的抗人免疫球蛋白抗体,催化底物显色,终止反应后测定吸光度,通过标准曲线换算样本中HSVⅡ抗体的浓度。
基本参数:

产品名称:人单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体(HSVⅡ-Ab)ELISA试剂盒
英文名称:HSVⅡ-Ab Elisa Kit
货号:Y-E747
规格:48T/96T
灵敏度:最低可检出 1:10 稀释阳性样本
检测范围:1:10 ~ 1:400
反应时间:样本结合 88min,二抗 46min,避光显色 20min,全程 154min
显色系统:单组分 TMB 显色试剂
检测波长:450nm,参考 630nm
特异性:对 Ⅱ 型包膜蛋白抗体特异识别,极少与 Ⅰ 型发生非特异结合
重复性:板内 CV<7.7%,板间 CV<9.1%
注意事项:生殖道分泌物样本需稀释后检测,加样枪头一孔一换杜绝交叉污染
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

试剂室温静置 34min,稀释浓缩洗涤液,拆分酶标板,未使用板条密封冷藏避光存放。
梯度配制 HSVⅡ-Ab 标准品并每孔加液 50μL,待测临床血清样本稀释后加入样本孔 50μL,空白孔补稀释缓冲液。
全部孔位加入酶偶联二抗工作液 100μL,覆膜封板,横向轻晃酶标板混匀。
37℃恒温避光孵育 60min,减少孵育箱开门频次保证温度稳定。
洗板 5 次,每次浸泡 33s,倒净液体后吸水纸拍干微孔。
避光依次添加显色 A 液、B 液各 50μL,轻柔混匀,室温避光显色 18min。
加入终止液终止酶促显色,450nm 波长测定吸光度,计算 HSVⅡ 抗体浓度。
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