人吖啶橙(AO)ELISA试剂盒

本试剂盒采用竞争ELISA法检测人样本中吖啶橙(AO)含量。试剂盒微孔板预先包被AO特异性抗原，待测样本中的AO与固相包被抗原竞争结合有限的AO特异性抗体，孵育反应后洗去未结合组分，再加入HRP标记的二抗结合已结合的一抗。加入TMB底物进行酶促显色反应，底物显色深浅与样本中AO浓度呈负相关，即样本中AO含量越高，竞争结合的抗体越多，固相结合的抗体越少，显色越浅。通过酶标仪测定吸光度，结合标准曲线即可定量分析样本中AO的含量。
产品参数：

‌灵敏度：≤0.02μg/mL

检测范围：0.05μg/mL–5μg/mL

反应时间：封闭 30min，样本孵育 70min，显色 12min

显色系统：OPD 显色液，硫酸终止

检测波长：492nm

特异性：专一结合游离态吖啶橙，核酸结合态 AO 检出偏差＞20%

重复性：板内 CV＜7%，板间 CV＜9%

注意事项：该试剂具有弱毒性，操作佩戴手套，废液需集中无害化处理
储存与有效期：

未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。

开封后保存

剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。

HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。

浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。

复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。

过期试剂禁止使用。

公司正在出售的产品：

实验操作流程：

试剂盒室温静置 30min 恢复环境温度，取出可拆卸酶标板，规划实验孔排布，标注组别。

梯度配制 AO 标准品液，标准孔加标准品 50μL；样本孔加入离心澄清后的待测样本 50μL；空白孔无添加。

全部检测孔加入一步法酶标记结合液 50μL，横向晃动酶标板混匀，封板膜严实密封微孔。

37℃恒温培养箱避光孵育 70min，杜绝温度大幅波动。

彻底倾倒孔中液体，洗板液灌满每孔，浸泡 40s 后在吸水纸上拍净残液，连续洗板 6 次。

每孔依次添加显色液 A、B 各 50μL，遮光混匀，37℃避光显色 18min。

加入终止液 50μL 终止底物反应，震荡混匀，5min 内在 450nm 波长检测 OD 值，计算样本 AO 浓度。