本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理,固相微孔板包被有人二氢嘧啶酶样2(DPYSL2)特异性抗体,实验中样本内的DPYSL2抗原与固相抗体特异性结合,随后加入的辣根过氧化物酶标记DPYSL2检测抗体可与之结合形成稳定免疫复合物,彻底洗涤游离组分后,底物在酶的催化下产生显色反应,依据显色深浅对应的吸光度数值,可定量测定样本中人DPYSL2的含量。
基本参数:

产品名称:人二氢嘧啶酶样2(DPYSL2)ELISA试剂盒
英文名称:DPYSL2 Elisa Kit
货号:Y-E910
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测下限 0.08ng/mL
检测范围:0.25ng/mL - 16ng/mL
反应时间:一抗孵育 90min,二抗孵育 45min,避光显色 20min
显色系统:双组份 A+B TMB 显色体系,2M H₂SO₄终止
检测波长:450nm 单波长测定
特异性:靶向识别人 DPYSL2 抗原,同家族 DPYSL3/4 交叉反应<2.8%
重复性:批内变异系数≤6.5%,批间变异系数≤8.7%
注意事项:血清样本不可反复冻融超过 2 次;显色全程避光,防止底物氧化失效
关键注意事项:

本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
实验步骤如下:

试剂盒试剂常温放置 25min 回温,用样本稀释液梯度稀释 DPYSL2 标准品,按照实验排布在 96 孔板标注组别,预留复孔。
空白孔加样本稀释液 50μL,标准品孔与待测样本孔分别加入对应液体 50μL,紧接着每孔添加酶标记抗体工作液 100μL。
封板膜严实封盖酶标板,置于 37℃恒温环境避光孵育 45min,期间不可随意掀开封板。
倒掉孔内反应废液,每孔注满洗涤液静置 40s 后倒扣拍净残液,连续洗板 4 次,确保孔内无残留杂蛋白干扰。
按配比现配显色混合液,每孔加入 100μL 显色液,避光条件下 37℃孵育显色 12min,观察梯度孔颜色区分度。
向每孔滴加终止液 50μL,水平缓慢摇晃酶标板 10s,彻底终止酶促显色反应。
酶标仪选用 450nm 波长测定各孔 OD 值,拟合标准曲线换算样本中 DPYSL2 具体含量,记录实验数据。
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