本试剂盒依托酶联免疫吸附特异性反应原理,以包被于人二氢嘧啶酶样3(DPYSL3)特异性抗体的微孔板为固相载体,孵育后样本中的DPYSL3抗原与固相抗体精准结合,再与酶标记对应检测抗体形成夹心式免疫复合物,经洗涤去除非特异性结合物质,通过酶催化底物显色,吸光度值与样本DPYSL3浓度呈正比,从而实现对人DPYSL3的定量检测。
基本参数:

产品名称:人二氢嘧啶酶样3(DPYSL3)ELISA试剂盒
英文名称:DPYSL3 Elisa Kit
货号:Y-E902
规格:48T/96T
灵敏度:检出极限 0.05ng/mL
检测范围:0.1ng/mL - 20ng/mL
反应时间:封闭 30min,样本孵育 75min,酶标二抗孵育 40min,显色 12min
显色系统:改良 TMB 可溶性显色液,盐酸终止液
检测波长:450nm,参考 600nm
特异性:不与 DPYSL1、2、5 发生明显交叉结合,同源蛋白交叉率<2.2%
重复性:板内 CV≤5.8%,板间 CV≤8.2%
注意事项:待测组织匀浆需充分裂解并去除沉淀;洗板每孔浸泡 30s 再拍干,减少非特异吸附
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

将试剂盒内酶标板、标准品、酶试剂、显色液全部取出室温平衡,配制梯度浓度 DPYSL3 标准系列溶液,规划板孔排布。
各孔依次添加标准品、待测样本、空白稀释液各 50μL,同步加入一步法免疫酶复合物工作液 90μL,封板封口。
37℃隔水式恒温培养箱避光孵育 70min,保证孵育温度稳定无大幅波动。
去除封板,倾倒废液,每孔加满洗涤液浸泡 25s,用力拍干板内液体,重复洗板 6 轮。
每孔分别添加 TMB 显色 A 液、B 液各 50μL,轻微震荡混匀,室温避光显色 20min。
每孔加入终止硫酸溶液 50μL,充分混匀终止反应,终止后避免强光直射酶标板。
即刻使用酶标仪 450nm 读数,依据标准曲线方程计算待测样本 DPYSL3 浓度,导出检测结果。
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