本试剂盒基于抗原抗体特异性结合的双抗体夹心ELISA原理,定量检测人样本中阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)。将AGPs特异性抗体固定于微孔板表面作为捕获抗体,加入待测样本后,样本中的AGPs抗原与固相抗体特异性结合,洗除游离杂质。加入HRP标记的AGPs检测抗体,与抗原结合形成夹心免疫复合物,经充分洗涤后加入TMB底物进行显色反应,酶促反应生成有色产物,终止反应后检测吸光度。样本中AGPs浓度越高,免疫复合物富集量越多,显色信号越强,通过标准曲线换算即可得到样本中AGPs的精准含量。
产品参数:
产品名称 | 人阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E3529 |
英文名称 | AGPs ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:≤8ng/mL
检测范围:25ng/mL–1600ng/mL
反应时间:包被后孵育样本 80min,二抗 50min,避光显色 18min
显色系统:单组份 TMB 显色
检测波长:450nm
特异性:仅针对人源阿拉伯半乳糖蛋白,糖基修饰同源蛋白无交叉反应
重复性:板内 CV<6.2%,板间 CV<8.3%
注意事项:样本不可含高浓度多糖杂质,会造成非特异性吸附
关键注意事项:
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
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实验操作流程:
试剂盒放置室温 32min 充分回温,拆开酶标板外包装,固定板条,区分标准孔、样本孔、空白孔并标记编号。
标准孔添加梯度稀释 AGPs 标准品 50μL;样本孔加入稀释后的待测上清样本 50μL;空白孔不添加任何液体。
非空白孔直接添加一步法酶标二抗混合工作液 50μL,手动缓慢晃动酶板混匀,封板膜密封。
37℃恒温孵育 62min,全程避光防止试剂失活。
倒掉孔内混合液,每孔加满洗涤液浸泡 35s,用力拍干微孔,反复洗板 4 次。
每孔分别加入显色液 A 50μL、显色液 B 50μL,避光震荡混匀,37℃避光显色 14min。
加入终止液 50μL 终止显色,混匀后即刻上机,450nm 检测吸光值,对照标准曲线求出 AGPs 浓度。
关键字: 人阿拉伯半乳糖蛋白;AGPs;ELISA试剂盒;
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