人蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP/PTPase/CD148)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA技术原理，微孔板预先固定人蛋白酪氨酸磷酸酶特异性捕获抗体，加入待测样本与梯度标准品，样本中的PTP抗原与固相抗体特异性结合，洗涤后加入酶标检测抗体形成夹心复合物，再次洗板去除未结合酶标抗体，加入显色底物发生催化显色反应，显色强度与样本中PTP浓度正相关，通过吸光度检测与标准曲线比对实现定量检测。
基本参数‌：

产品名称：人蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP/PTPase/CD148)ELISA试剂盒

英文名称：PTP/PTPase Elisa Kit
货号：Y-E3033

规格：48T/96T

灵敏度：≤0.14ng/mL

检测范围：0.28ng/mL - 18ng/mL

反应时间：总时长 118min（样本 63min，二抗 35min，显色 20min）

显色系统：标准 HRP 偶联 TMB 显色

检测波长：450nm+630nm 双波长

特异性：特异性结合 CD148 型 PTP，不结合其他磷酸酶亚型

重复性：板内 CV＜6.6%，板间 CV＜8.3%

注意事项：终止后 15min 内必须完成酶标仪读数，否则 OD 值衰减
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂盒室温平衡 30min，配比稀释浓缩洗涤液，配制 PTP 梯度标准品，酶标板分区标记。

标准孔、样本孔、空白孔分别加对应液体，每孔加入一步法酶标记工作液，封板膜密封。

37℃避光孵育 52min，完成免疫结合反应。

弃液洗板，每孔加满洗涤液静置 28s，洗板 4 次后拍干残留液体。

加入显色液，混匀后 37℃避光显色 12min。

加入终止液终止显色，充分混匀板面。

450nm 酶标仪读取 OD 值，标准曲线法计算 PTP 含量。
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