本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附原理,固相微孔板预先包被人受体酪氨酸激酶(RTKs)特异性抗体,加入待测样本和梯度标准品后,样本中的RTKs抗原与固相抗体特异性结合,洗涤纯化反应体系后加入酶标记配对抗体,构建夹心免疫复合物,显色终止后检测吸光度,吸光度值与样本中RTKs含量呈正相关,可实现精准定量。
基本参数:

产品名称:人受体酪氨酸激酶(RTKs)ELISA试剂盒
英文名称:RTKs Elisa Kit
货号:Y-E3048
规格:48T/96T
灵敏度:最低检出 1.4ng/L
检测范围:7ng/L ~ 730ng/L
反应时间:室温孵育 87min,酶标记二抗 58min,避光显色 23min,合计 2h48min
保存条件:试剂盒 2~8℃避光存放,底物液单独避光包装,不可与热源靠近
显色系统:即用型 TMB 显色液,1M 硫酸终止反应
检测波长:450nm 搭配 630nm 双波长读数
标准曲线绘制:半对数坐标拟合标准曲线,7 个浓度梯度
注意事项:磷酸化修饰样本需添加磷酸酶抑制剂预处理;脂血样本稀释后再检测
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

试剂盒试剂室温静置 26min,配制洗涤工作液,倍比稀释 RTKs 标准品,标记酶标板孔。
标准孔添加 50μL 梯度标准品;样本孔加 50μL 稀释液 + 10μL 待测样本;空白孔空置不加液。
非空白孔加入酶结合抗体 100μL,封板密封,37℃孵育 58min。
撕膜弃液,洗涤液加满每孔静置 32s,甩干洗板 5 次,拍干微孔板。
显色 A、B 液各 50μL 每孔添加,震荡混匀,避光显色 14min。
滴加 50μL 终止液混匀终止显色。
450nm 波长检测 OD 值,计算样本 RTKs 含量。
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