本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理，微孔板预先固定人电子转移黄素蛋白β肽特异性抗体，加入待测样本后，样本中的ETFB抗原与固相抗体特异性结合，洗涤去除游离无关物质，加入酶标检测抗体形成稳定夹心免疫复合物，底物显色后，有色产物吸光度值与样本中ETFB蛋白浓度呈正相关，可精准完成样本定量检测。
基本参数：
产品名称：人电子转移黄素蛋白β肽(ETFB)ELISA试剂盒
英文名称：ETFB ELISA Kit
货号：Y-E2958
规格：48T/96T
灵敏度：≤0.07ng/mL
检测范围：0.14ng/mL - 8.96ng/mL
反应时间：总时长 148min（样本 83min，二抗 45min，显色 20min）
显色系统：双组分混合 TMB 显色
检测波长：450nm
特异性：仅靶向 ETFBβ 亚基多肽，α 亚基无交叉结合
重复性：板内 CV＜5.1%，板间 CV＜6.6%
注意事项：线粒体提取样本需去除核蛋白杂质，防止非特异性吸附
关键注意事项：
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）
避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果
显色过程需避光，避免阳光直射影响结果
实验步骤如下：
试剂盒常温回温 30min，稀释浓缩洗涤液，梯度稀释 ETFB 标准品，标记酶标板空白、标品、待测孔。
各孔添加标准品、预处理待测样本、空白缓冲液，加入酶标抗体工作液，封板膜封口。
37℃避光孵育 62min，一步夹心免疫捕获靶蛋白。
弃净废液，洗涤液浸泡 31s，洗板 5 次，倒扣拍干板条。
加入显色双底物混匀，37℃避光显色 16min。
滴加终止液停止显色反应，轻晃混匀。
450nm 酶标仪读数，依托标准曲线计算 ETFB 蛋白含量。
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