人对氨基苯甲酸(PABA)ELISA试剂盒

本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验原理，微孔板包被PABA人工抗原，待测样本中的PABA与固相包被的PABA抗原竞争性结合有限的酶标记特异性抗体，样本中PABA含量越高，结合在固相载体上的酶标抗体越少，后续底物显色越浅，终止反应后检测吸光度，吸光度值与样本中PABA浓度呈负相关，通过标准曲线拟合即可定量检测样本中PABA的含量。
基本参数‌：

产品名称：人对氨基苯甲酸(PABA)ELISA试剂盒

英文名称：PABA ELISA Kit
货号：Y-E2651

规格：48T/96T

灵敏度：检出极限≤1.5nmol/L

检测范围：5nmol/L～320nmol/L

反应时间：室温避光孵育 55min，二抗 30min，显色 11min

显色系统：标准 TMB 双液显色

检测波长：450nm 参考 570nm

特异性：特异性结合游离 PABA，对苯甲酸衍生物交叉反应率低于 3%

重复性：板内 CV＜6.8%，板间 CV＜11%

注意事项：尿液样本需过滤去除结晶沉淀，防止微孔堵孔
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂盒室温平衡 28min，配置洗涤缓冲液，取出酶标板，按需截取微孔条，剩余密封保存。

标准品孔、样本孔分别加入对应液体 50μL，空白孔不添加任何试剂。

所有加样孔加入酶标记结合液 100μL，轻晃酶板混匀，封板密封。

37℃孵育 50min，防尘静置反应。

弃液洗板，每次浸泡 35s 拍干，重复洗板 5 次。

避光加入显色 A、B 液各 50μL，混匀后 37℃显色 12min。

终止液终止反应，450nm 读数，依据标准曲线计算 PABA 含量。
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