本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理,微孔板预先包被人PHSA特异性捕获抗体,加入待测血清样本和梯度标准品,样本中的PHSA抗原与固相抗体发生特异性结合,洗涤去除游离杂质与杂蛋白,加入酶标记PHSA检测抗体形成免疫复合物,底物显色深浅对应PHSA浓度高低,通过吸光度检测和标准曲线拟合,精准定量样本中PHSA的含量。
基本参数:

产品名称:人多聚血清蛋白(PHSA)ELISA试剂盒
英文名称:PHSA ELISA Kit
货号:Y-E2995
规格:48T/96T
灵敏度:最低检出 0.2μg/mL
检测范围:0.625μg/mL~40μg/mL
反应时间:室温样本 58min,酶标二抗 31min,显色 10min
显色系统:标准 HRP-TMB 显色
检测波长:450nm 为主波长
特异性:特异性结合多聚化白蛋白,单体白蛋白结合能力极低
重复性:批内 CV≤7.2%,批间 CV≤11.8%
注意事项:严重黄疸血清会轻微升高背景值,建议设置空白对照
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

试剂盒室温平衡 27min,稀释浓缩洗涤液,拆分酶标板,预留板条密封冷藏。
孔位标记后,标准品与待测血清样本每孔上样 50μL,空白孔不加试剂。
直接加入一步法酶标记液 100μL,轻晃酶板混匀,封板封口。
37℃恒温孵育 52min,防尘环境静置反应。
弃除孔内液体,洗涤液浸泡 35s 拍干,洗板 5 次。
避光加入显色双液各 50μL,混匀显色 12min。
终止液终止显色,450nm 检测 OD 值,计算 PHSA 浓度。
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