本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附原理,微孔板固相包被人Agouti相关蛋白特异性捕获抗体,加入标准品与待测样本,样本中的AGRP抗原与固相抗体特异性结合,孵育洗涤清除游离杂质,加入酶标记AGRP检测抗体孵育结合,形成特异性免疫复合物,洗涤后加入底物显色,显色强度与样本中AGRP蛋白含量呈正相关,通过吸光度值和标准曲线校准,可精准检测样本中Agouti相关蛋白的表达水平。
基本参数:

产品名称:人Agouti相关蛋白(AGRP)ELISA试剂盒
英文名称:AGRP ELISA Kit
货号:Y-E3506
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测0.06ng/mL,适配代谢调控蛋白微量检测
检测范围:0.1ng/mL - 40ng/mL,覆盖能量代谢、食欲调控异常表达区间
反应时间:标准反应时长95分钟,快速完成检测
保存条件:2-8℃密封避光保存,试剂防潮防氧化
有效期:原装有效期7个月,开封后20天内使用
特异性:特异性结合人AGRP蛋白,与同类代谢调控蛋白无交叉结合
重复性:板内CV≤7.8%,板间CV≤10%,数据稳定
注意事项:样本避免反复冻融,防止蛋白降解;试剂配比严格按说明书操作,禁止随意更改参数
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

样本制备:血浆样本冰浴解冻,离心去除纤维蛋白沉淀;标准品复溶后逐级稀释 6 个梯度浓度。
孔位加样:空白对照孔加入样本稀释液 50μL,标准品孔、待测样本孔各加液 50μL。
一步添加酶标记抗原液:所有反应孔加入 HRP 标记工作液 100μL,封板密封酶标板。
恒温孵育:37℃避光孵育 67min。
洗板流程:洗板 5 次,每次浸泡 31s,吸水纸吸干孔内废液。
避光显色:每孔加入显色 A 液、B 液各 50μL,37℃反应 15min。
终止读数:终止液终止显色,450nm 波长检测 OD 值,依据标准曲线换算 AGRP 含量。
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