人补体片断5b(C5b)ELISA试剂盒

本试剂盒基于经典双抗体夹心ELISA检测原理，微孔板固相表面包被有人C5b特异性捕获抗体，待测样本中的人补体片断5b抗原可与固相抗体发生特异性免疫结合，经洗涤去除未结合物质后，加入对应的酶标检测抗体形成稳定免疫夹心复合物，充分反应后洗涤除去游离酶标抗体，加入显色底物，在酶的催化作用下生成有色显色产物，产物吸光度值与样本中C5b浓度成正比，依据标准曲线计算即可完成样本中靶标蛋白的定量检测。
产品参数：

‌灵敏度：最低检出限 0.03ng/mL

检测范围：0.1ng/mL–6.4ng/mL

反应时间：全程 95min（一抗包被结合 50min，酶标二抗 25min，避光显色 12min，终止读数）

显色系统：双组份 A+B 显色底物，HRP 催化显色

检测波长：单波长 450nm 直接读数

特异性：专一识别 C5b 片段，对完整 C5、C5a 交叉反应率＜2.5%

重复性：板内 CV≤5.8%，板间 CV≤7.2%

注意事项：显色步骤必须严格避光；标准品稀释现配现用，不可 4℃隔夜存放；洗涤液充分洗板防止非特异性吸附。
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。

公司正在出售的产品：

实验操作流程：

取出试剂盒所有组分放置室温回温 25min，用样本稀释液梯度配制 C5b 系列标准品，划分酶标板孔位组别。

标准品孔添加梯度 C5b 标准液，待测孔加入预处理后人待测生物样本，空白孔添加同等体积样本稀释液。

无需洗板直接向全部反应孔滴加酶标记抗体工作液，封板封口，37℃湿盒内避光孵育 55min 完成抗原抗体一步结合。

掀开封板，倾倒孔内废液，洗板机自动洗板 4 次，手动拍净孔内残留洗涤液，杜绝交叉污染。

每孔加入 TMB 单组分显色液，避光环境下室温反应 12min，把控显色深浅区间避免过曝。

快速加注硫酸终止液终止催化反应，轻柔震荡酶标板 30 秒保证孔内液体混匀均匀。

酶标仪测定 450nm 光吸收值，绘制 C5b 标准曲线，代入样本 OD 值换算样本浓度，记录实验原始数据。