本试剂盒基于酶联免疫吸附特异性检测原理,微孔板预先固定人泛素蛋白D(UBD)特异性抗体,待测样本中的UBD抗原可与固相抗体特异性结合,再结合辣根过氧化物酶标记的检测抗体形成夹心复合物,经洗涤、底物显色、终止反应后,测定吸光度值,结合标准曲线即可定量检测样本中人UBD的含量。
基本参数:

产品名称:人泛素蛋白D(UBD)ELISA试剂盒
英文名称:UBD ELISA Kit
货号:Y-E2951
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测 0.06ng/mL
检测范围:0.15ng/mL - 22ng/mL
反应时间:封闭 35min,样本孵育 85min,酶二抗 42min,显色 19min
显色系统:双组分 TMB 显色,盐酸终止
检测波长:450nm+600nm
特异性:仅靶向 UBD 蛋白,不识别 Ub、UBA5 等同家族蛋白
重复性:板内 CV≤6.8%,板间 CV≤8.5%
注意事项:尿液样本需过滤除菌后再检测;微孔板开封后一次性用完剩余孔条密封冷藏
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

试剂盒组分室温平衡 26min,稀释洗涤液与标准品稀释液,梯度制备 UBD 标准品,标注酶标板孔位分组。
空白孔加稀释液,其余孔加入标准品或待测样本 50μL,同步添加一步法酶复合物 100μL,封板。
37℃避光孵育 60min,保证孵育环境无强光照射。
弃液后加满洗涤液浸泡 30s,拍干,连续洗板 5 次。
每孔加入显色底物混合液 100μL,37℃避光显色 19min。
加入终止液 50μL / 孔,摇晃酶标板混匀终止反应。
酶标仪 450nm 读数,依据标准曲线计算样本 UBD 含量。
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