本试剂盒采用间接酶联免疫吸附试验原理，将纯化的表皮细胞基底膜抗原包被于酶标板微孔，待测样本中的抗表皮细胞基底膜抗体与固相抗原特异性结合，洗涤去除游离杂质后，加入酶标记抗人特异性二抗孵育结合，经显色、终止反应后测定吸光度，对照标准曲线计算样本中EBMZ抗体的浓度。
基本参数：
产品名称：人抗表皮细胞基底膜抗体(EBMZ)ELISA试剂盒
英文名称：EBMZ Elisa Kit
货号：Y-E440
规格：48T/96T
灵敏度：临界 OD 0.18
检测范围：定量 0.5–24RU/mL
反应时间：样本孵育 85min，二抗 50min，显色 17min，合计 152min
保存条件：整套试剂 2～8℃，底物液必须避光存放
显色系统：单组份 TMB 显色液
检测波长：450nm
标准曲线绘制：6 点校准品四参数拟合标准曲线换算结果
注意事项：大疱性皮肤病样本为主；孔内不可残留气泡再读数
关键注意事项：
本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。
终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。
终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：
样本提纯处理
血清样本 12000rpm 离心 10min 去除沉淀杂质，分装冻存样本避免反复冻融。
试剂平衡稀释
试剂盒所有组分室温静置 26min，稀释浓缩洗涤液配制成使用液。
标准品梯度配制
EBMZ 抗体标准品充分溶解后梯度稀释，依次加 50μL 至标准系列微孔，空白孔加稀释缓冲液。
样本共孵育加液
待测样本 50μL 入孔，加入生物素标记基底膜抗原 50μL，封板 37℃孵育 68min。
多次洗板操作
倾倒废液，洗涤液浸泡 35s 拍干，连续洗板 6 次，吸水纸彻底吸干微孔。
亲和素结合显色
加入 HRP 亲和素工作液孵育 28min，洗板后添加显色液避光显色 16min。
终止上机定量
终止液终止显色反应，450nm 读取吸光度，绘制标准曲线计算抗体浓度。
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