本试剂盒采用间接ELISA核心检测原理,微孔板预包被纯化的人肾小管基底膜(TBM)抗原,待测样本中的抗肾小管基底膜抗体可与固相TBM抗原特异性结合,孵育反应后洗除游离与非特异性结合物质;加入辣根过氧化物酶标记的抗人二抗,与固相上的TBM抗体精准结合,构建免疫复合物;底物酶促显色后,显色深浅与样本中TBM抗体含量正相关,终止显色后检测吸光度,结合标准曲线完成定量检测。
基本参数:

产品名称:人抗肾小管基底膜抗体(TBM)ELISA试剂盒
英文名称:TBM ELISA Kit 96T/48T
货号:Y-E2516
规格:48T/96T
灵敏度:0.38IU/mL
检测范围:0.76IU/mL - 24.32IU/mL
反应时间:孵育 64min、34min 两步,显色 15min
保存条件:整套试剂 2~8℃,洗涤液工作液现配现用,不可隔夜使用
显色系统:即用型 TMB 单液显色
检测波长:450nm
标准曲线绘制:7 点梯度标准品四参数拟合曲线,软件自动换算样本浓度
注意事项:急进性肾小球肾炎相关指标,肾功能衰竭急性期样本优先检测
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

试剂盒全部组分室温静置 25min,取出微孔板条固定于板架,编号区分空白孔、对照孔、待测样本孔。
样本稀释处理后单孔加样 82μL,阴性与阳性对照孔加入对应对照液 82μL,空白孔不添加液体。
一步法直接加入酶结合工作液 82μL 至所有检测孔,封板封口,轻摇酶标板 30s 混匀液体。
37℃水浴孵育 50min,保证水浴液面高于微孔内液面高度。
揭膜弃液,洗涤液灌满每孔浸泡 33s 倒掉,连续洗板 5 次,吸水纸充分拍干微孔残留洗液。
每孔依次滴加显色 A 液、B 液各 50μL,避光混匀,37℃避光显色 13min。
滴加终止液 50μL 终止反应,摇匀后酶标仪 450nm 测定吸光度,对照标准曲线换算 TBM 抗体含量。
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