本试剂盒基于间接酶联免疫吸附试验原理，将纯化的人肾小球基底膜（GBM）抗原固定于微孔板表面，待测样本中的抗GBM抗体可与固相GBM抗原特异性免疫结合；孵育结束后洗板清除未结合杂质，加入酶标记抗人二抗与结合的GBM抗体结合，形成抗原-抗体-酶标二抗复合物；经洗板纯化反应体系后加入底物显色，显色强度与样本中GBM抗体含量成正比，终止反应后检测吸光度，对照标准曲线精准定量抗体水平。
基本参数：
产品名称：人抗肾小球基底膜抗体(GBM)ELISA试剂盒
英文名称：GBM Elisa Kit
货号：Y-E3148
规格：48T/96T
灵敏度：0.26AU/mL
检测范围：0.52AU/mL - 16.64AU/mL
反应时间：37℃孵育 72min，二抗 41min，显色 18min
保存条件：2~8℃冷藏，禁止冷冻包被微孔板，抗原会彻底失活
显色系统：A、B 双组份底物混合显色
检测波长：450nm，630nm 校正本底
标准曲线绘制：6 个浓度点构建标准曲线，剔除漂移孔后重新拟合
注意事项：肺出血肾炎综合征特征性抗体，阳性需同步检查尿常规与肺部影像学
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
试剂盒室温回温 37min，取出预装包被酶标板，设置实验孔位并标记，多余板条密封 2~8℃避光存放。
稀释待测样本加入样本孔 68μL，阴阳性对照孔添加对应对照试剂 68μL，空白孔空置不加样。
直接向所有加样孔加入酶标记二抗液 68μL，覆膜密封，缓慢震荡酶标板混匀反应体系。
37℃恒温避光孵育 60min，全程规避强光直射。
撕开封板膜，倾倒孔内废液，洗涤液注满每孔浸泡 36s 甩干，重复洗板 6 次，彻底拍干微孔水分。
每孔加入显色混合底物液 100μL，37℃避光显色 11min。
加入终止液 50μL 终止显色，混匀后 10min 内 450nm 读取 OD 值，参照标准曲线判读抗体结果。
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