本试剂盒基于间接酶联免疫吸附试验原理,酶标板微孔包被风疹病毒特异性抗原,待测样本中的抗风疹病毒IgG抗体与固相抗原特异性结合,洗涤去除未结合组分,加入酶标记抗人IgG二抗孵育结合,经底物显色、终止反应后检测吸光度,结合标准曲线精准测定样本中anti-RV IgG抗体的含量。
基本参数:

产品名称:人抗风疹病毒IgG抗体(anti-RV IgG)ELISA试剂盒
英文名称:anti-RV IgG ELISA Kit
货号:Y-E2722
规格:48T/96T
灵敏度:0.1IU/mL
检测范围:0.2–35IU/mL
反应时间:样本孵育 75min,酶结合物 50min,显色 14min,总 139min
保存条件:2~8℃冷藏,开封后试剂 3 周内用完
显色系统:HRP 催化 TMB 底物显色
检测波长:450nm
标准曲线绘制:标准品梯度稀释拟合曲线,>10IU/mL 判定具备免疫力
注意事项:孕前筛查首选;既往感染与现症感染需搭配 IgM 结果解读
实验前准备工作:

1. 试剂平衡与稀释
试剂盒所有组分(酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液)从 2~8℃取出,室温(20~25℃)放置平衡 30min,严禁直接低温操作。
浓缩洗涤液配制:按标签标注比例用去离子纯水稀释(常见 20× 浓缩液:1 份浓缩液 + 19 份纯水),混匀备用,现配现用。
标准品复溶 / 梯度稀释:
冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解,室温静置 10min,轻柔吹打混匀;
按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品,单独标记,剩余原液分装 - 20℃避光保存,避免反复冻融。
待测样本预处理:血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释,浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清;溶血、脂血严重样本弃用。
2. 耗材与设备准备
设备:恒温 37℃孵育箱、酶标仪(450nm 主波长,630nm 参比)、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机(或手动洗板槽)、封板膜、离心管。
耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染,移液枪提前校准。
取出本次实验所需酶标板条,剩余未使用板条装入铝箔密封袋,加干燥剂 2~8℃避光保存。
3. 孔位规划标记
酶标板做好分区标记:空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔(所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差)。
实验步骤如下:

血清样本制备
静脉血分离血清,溶血样本直接弃用,样本 4℃保存不超 48h,长期分装 - 20℃冻存。
试剂盒试剂稀释平衡
所有试剂室温放置 30min,稀释浓缩洗涤液配制成工作洗涤液,现配现用。
标准品梯度加孔
风疹 IgG 标准品溶解后梯度稀释 6 梯度,每孔添加 50μL 标准品稀释液。
一步法孵育加液
待测样本 50μL 入孔,加入酶标记抗人 IgG 二抗 + 风疹抗原混合液 50μL,封板 37℃孵育 60min。
微孔洗涤流程
弃净孔内液体,洗涤液浸泡 30s 拍干,循环洗板 5 次,防止交叉污染。
避光显色反应
每孔加入显色液 A、B 各 50μL,遮光 37℃显色 13min。
终止结果判读
终止液终止显色,450nm 测定吸光度,判定风疹 IgG 抗体阴阳性与滴度。
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