本试剂盒采用间接酶联免疫吸附检测原理,将人肝细胞膜特异性抗原包被于酶标板微孔固相,封闭非特异性结合位点后加入待测样本,样本中的抗肝细胞膜抗体可与固相抗原精准特异性结合;洗涤去除未结合的杂蛋白与游离成分,加入酶标记抗人二抗孵育结合,充分洗涤后加入底物进行酶促显色,通过检测吸光度值,结合标准曲线,定量分析样本中LMA抗体的含量。
基本参数:

产品名称:人抗肝细胞膜抗体(LMA)ELISA试剂盒
英文名称:LMA Elisa Kit
货号:Y-E460
规格:48T/96T
灵敏度:最低可测 1.1AU/mL
检测范围:1.5AU/mL~24AU/mL
反应时间:包被板结合样本 65min;二抗孵育 42min;避光显色 14min
保存条件:未开封 2~8℃;拆开板条装入自封袋加干燥剂冷藏
显色系统:HRP-TMB 单组分显色
检测波长:450nm
标准曲线绘制:以标准品梯度浓度与 OD 值建立线性标准曲线,代入计算样本抗体滴度
注意事项:待测样本避免反复冻融 3 次以上;操作避免阳光直射底物液
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

样本稀释处理:血清样本以稀释液 1:110 稀释,颠倒混匀,室温静置 9min,重度黄疸样本不宜检测。
板孔加样:预包被板各孔加入空白液、对照液、稀释样本各 100μL,避免孔间交叉污染。
一步添加酶标抗体液:全部孔直接加入酶标记二抗 100μL,密封封板,水平震荡 40s。
孵育反应:37℃恒温避光孵育 65min,保证孵育环境无光线照射。
洗板操作:弃液,加满洗涤液浸泡 30s,拍干,重复洗板 5 次。
显色步骤:分加 A、B 显色液各 50μL,混匀后 37℃避光显色 13min。
终止检测:终止液终止反应,5min 内 450nm 测 OD 值,比对临界值判读阴阳性。
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