本试剂盒运用双抗体夹心ELISA法检测人核基质蛋白22(NMP-22)浓度,微孔板预先包被人NMP-22特异性捕获抗体,加入待测样本和标准品后,样本中的NMP-22抗原与固相抗体特异性结合,洗涤去除未结合成分,加入酶标记检测抗体构建免疫复合物,经底物显色、终止反应后检测吸光度,吸光度数值与样本中NMP-22含量成正比,通过标准曲线可实现目标蛋白的定量检测。
产品参数:
产品名称 | 人核基质蛋白22(NMP-22)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E3521 |
英文名称 | NMP-22 ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检出 1.0U/mL
检测范围:1.2U/mL~120U/mL
反应时间:室温孵育 80min,酶结合物 45min,总时长 170min
显色系统:单组份长效 TMB 显色液
检测波长:450nm,校正 580nm
特异性:特异性结合尿液中人 NMP22,无尿蛋白非特异结合
重复性:批内 CV≤7.0%,批间 CV≤10.0%
注意事项:晨尿样本最佳,放置超过 4h 需弃用重新取样
通用注意事项:
样本要求
血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸;组织匀浆充分离心去除沉淀;样本分装冻存,反复冻融≥3 次会导致抗原降解,检测值偏低。
温度控制
孵育温度严格 37℃,温箱温度波动、室温过低会降低结合效率,背景升高、重复性变差。
避光操作
TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化,显色全程避光,试剂避光存放。
洗板规范
洗涤不充分会造成高背景、假阳性;拍干时使用干净吸水纸,禁止交叉污染微孔。
污染防控
实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶;枪头一次性更换,标准品与样本避免交叉加样;底物液变色、出现沉淀不可使用。
安全防护
终止液含稀硫酸,具有腐蚀性,避免接触皮肤、黏膜;实验废液集中收集中和后处理,不可直接倾倒。
失效判定
试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异,均判定失效,禁止继续实验。
稀释校正
样本 OD 值高于最高标准孔时,必须稀释重测,最终结果乘以稀释倍数;低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。
空白对照
空白孔吸光度应极低,若空白孔 OD>0.1,说明洗涤不充分或试剂污染,实验作废重做。
储存禁忌
试剂盒不可冷冻结冰,冷冻会造成酶标抗体蛋白变性,直接导致试剂盒完全失效。
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实验操作流程:
试剂盒室温回温 30min,配比稀释洗涤液,拆分微孔板条,未用板条密封避光冷藏。
倍比稀释 NMP-22 标准品,尿液、体液待测样本离心过滤后稀释处理。
各微孔添加标准品、待测样本、空白液,随即加入酶结合物工作液,封板膜封口。
37℃避光孵育 58min。
倾倒孔内液体,洗涤液浸泡 30s,拍干洗板,连续洗涤 6 次。
加入显色液 37℃避光显色 12min。
滴加终止液混匀,酶标仪 450nm 读数,计算样本 NMP-22 含量。
关键字: 人核基质蛋白22;NMP-22;ELISA试剂盒;
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