本试剂盒基于间接酶联免疫吸附试验原理，将纯化的人核仁抗原包被于酶标板固相，封闭空白位点后加入待测样本，样本中的抗核仁ANA抗体可与固相核仁抗原特异性结合形成免疫复合物；洗涤去除游离杂质后，加入辣根过氧化物酶标记二抗结合免疫复合物，孵育洗涤后加入底物显色，吸光度值与样本中ANA抗体含量成正比，通过标准曲线实现定量检测。
基本参数：
产品名称：人抗核仁抗体(ANA)ELISA试剂盒
英文名称：ANA Elisa Kit
货号：Y-E435
规格：48T/96T
灵敏度：检出限 0.4AU/mL
检测范围：0.5AU/mL～32AU/mL
反应时间：一抗温育 70min；二抗 40min；避光显色 13min
保存条件：试剂盒 2～8℃，板条密封防潮，禁止冻存
显色系统：单组份 TMB 显色液
检测波长：450nm+630nm 双波长校正
标准曲线绘制：四参数 Logistic 曲线拟合，适用于宽浓度区间样本检测
注意事项：洗板需充分去除未结合蛋白，降低背景值；试剂使用前充分混匀
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
样本预处理：血清 1:130 稀释，吹打混匀，室温静置 10min，浑浊样本离心取上清。
板孔加样：标记各类孔位，每孔加对应液体 100μL，防止溅孔。
一步添加酶标二抗工作液：所有孔直接加酶标试剂 100μL，密封封板。
37℃避光孵育 70min，水平放置不可倾斜。
洗板 6 次，每次洗涤液浸泡 40s 后彻底拍干。
加入显色混合液 100μL，避光显色 20min。
终止反应后 450nm 检测 OD 值，依据 Cutoff 值判定阳性阴性。
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