本试剂盒运用间接ELISA检测原理,固相酶标板包被人核仁纤维蛋白(snoRNP/U3RNP)特异性抗原,待测样本中的AFA抗体可与固相抗原发生特异性免疫结合;充分孵育后洗涤去除未结合物质,加入酶标记抗人IgG二抗特异性结合目标抗体,再次洗涤后加入底物触发显色反应,显色强度与样本中AFA抗体浓度正相关,以此定量检测样本中目标抗体含量。
基本参数:

产品名称:人抗核仁纤维蛋白抗体(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA试剂盒
英文名称:AFA/snoRNP/U3RNP Elisa Kit
货号:Y-E407
规格:48T/96T
灵敏度:最小检测浓度 0.6AU/mL
检测范围:1AU/mL~12.8AU/mL
反应时间:样本孵育 85min;酶结合物孵育 38min;显色 17min
保存条件:2~8℃避光,稀释后的工作液仅限当日使用
显色系统:A+B 混合式 TMB 显色
检测波长:450nm
标准曲线绘制:标准品梯度点值拟合线性标准曲线,扣除空白本底计算结果
注意事项:溶血、乳糜血样本会造成非特异性吸光,建议重采样本
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

样本稀释:血清样本 1:85 稀释,涡旋混匀,室温静置 5min。
加样:各孔添加空白、对照、稀释样本 100μL。
一步加入酶标记抗原工作液 100μL,封板震荡 20s。
37℃避光孵育 48min。
洗板 4 次,每次浸泡 25s 拍干。
TMB 底物显色 12min,避光环境。
终止液终止,450nm 读数,对照试剂盒参考范围判读结果。
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