人抗胶原蛋白抗体(CLA)ELISA试剂盒

本试剂盒基于间接酶联免疫吸附检测原理，将人胶原蛋白特异性抗原固定于酶标板固相载体，待测样本中的抗胶原蛋白CLA抗体可与固相抗原发生特异性免疫结合；洗涤去除未结合杂蛋白与游离物质，加入酶标记二抗特异性结合目标抗体，充分洗涤后加入底物进行酶促显色，依据吸光度数值与标准曲线，定量测定样本中CLA抗体含量。
基本参数‌：

产品名称：人抗胶原蛋白抗体(CLA)ELISA试剂盒

英文名称：CLA Elisa Kit
货号：Y-E469

规格：48T/96T

灵敏度：最小检出 0.9ng/mL

检测范围：1ng/mL～32ng/mL

反应时间：样本结合 80min；二抗 36min；显色 15min

保存条件：未拆封 2～8℃；各类试剂不可倒置存放

显色系统：临配 A+B 混合显色液

检测波长：450nm

标准曲线绘制：四参数 Logistic 拟合曲线，适配宽动态范围检测

注意事项：移液操作精准，加样误差会大幅影响标准曲线拟合效果
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

样本稀释：血清样本 1:102 稀释，涡旋混匀，室温静置 6min。

标记孔位并添加对应试液 100μL / 孔。

一步加入酶标记胶原抗原结合液 100μL，封板。

37℃孵育 60min，避光。

洗板 5 次，浸泡 35s / 次。

显色 16min。

终止后 450nm 读取 OD 值，出具检测结论。
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