本试剂盒采用间接酶联免疫吸附试验原理，将纯化的GM1神经节苷脂抗原包被于微孔板固相载体，待测样本中的抗GM1神经节苷脂抗体可与固相抗原特异性免疫结合；孵育完成后洗板清除非特异性结合成分，加入酶标记抗人二抗与固相上的目标抗体结合，构建抗原-抗体-酶标二抗复合物；底物显色反应后，显色强度与样本中GM1抗体含量成正比，终止反应后检测吸光度，结合标准曲线完成定量检测。
基本参数：
产品名称：人抗神经节苷脂抗体(GM1)ELISA试剂盒
英文名称：GM1 Elisa Kit
货号：Y-E409
规格：48T/96T
灵敏度：0.5EU/mL
检测范围：1EU/mL - 32EU/mL
反应时间：37℃孵育 85min，二抗 45min，显色 19min
保存条件：2~8℃避光密封，包被板严禁受潮，受潮直接报废
显色系统：双组分底物显色体系
检测波长：450nm
标准曲线绘制：梯度稀释标准品，线性回归拟合，R² 需≥0.99 方可有效
注意事项：吉兰巴雷综合征常用筛查项目，外周神经损伤会造成假阳性升高
通用注意事项：
样本要求
血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。
温度控制
孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。
避光操作
TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。
洗板规范
洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。
污染防控
实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。
安全防护
终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。
失效判定
试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。
稀释校正
样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。
空白对照
空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。
储存禁忌
试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：
试剂盒室温放置 36min，取出预装微孔板，规划实验排布并标注孔号，剩余板条密封避光冷藏。
稀释待测样本加入样本孔 62μL，阴阳性对照孔添加对应对照液 62μL，空白孔不加液。
一步法直接添加酶标记结合液 62μL 至所有加样孔，覆膜封口，轻微摇晃酶标板混匀体系。
37℃恒温避光孵育 64min，防止光照破坏底物与酶活性。
撕膜倒净废液，洗涤液注满每孔浸泡 31s 弃去，重复洗板 6 次，充分拍干微孔内部残留液体。
每孔加入显色混合液 100μL，37℃避光显色 14min。
滴加终止液 50μL 终止反应，摇匀后 15min 内 450nm 读取吸光度，参照标准曲线定量 GM1 抗体数值。
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