本试剂盒运用间接酶联免疫吸附检测原理,微孔板固相包被纯化的神经元核Ri抗原,待测样本中的抗Ri抗体(ANNA-2)可与固相Ri抗原特异性免疫结合,孵育后洗去未结合杂蛋白;加入酶标记抗人二抗与结合的ANNA-2/Ri抗体结合,形成完整的免疫反应体系;经洗涤纯化后加入底物显色,显色强度随样本中目标抗体含量升高而增强,终止反应后检测吸光度,通过标准曲线定量测定抗体浓度。
基本参数:

产品名称:人抗神经元核抗体2型/抗Ri抗体(ANNA-2/Ri)ELISA试剂盒
英文名称:ANNA-2/Ri Elisa Kit
货号:Y-E446
规格:48T/96T
灵敏度:最低可检出稀释度 1:100 阳性血清
检测范围:仅定性阴阳性,不提供精准定量区间
反应时间:样本温育 92min,酶结合物 52min,避光显色 21min
保存条件:2~8℃避光保存,试剂避免强光直射
显色系统:HRP-TMB 显色
检测波长:450nm
标准曲线绘制:采用对照品做定性判定,不绘制标准曲线,超出临界值即为阳性
注意事项:常伴发乳腺癌、妇科肿瘤,结果不可单独作为疾病确诊依据
关键注意事项:

本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
实验步骤如下:

试剂盒室温平衡 34min,取出包被微孔板,划分各组孔位并做好标记,未使用板条密封冷藏保存。
待测稀释样本加入样本孔 52μL,阴性、阳性对照孔加入对应对照品 52μL,空白孔空置不加试剂。
直接向全部非空白孔滴加酶标记抗原工作液 52μL,封板膜严实封口,低速震荡混匀反应体系。
37℃恒温孵育 72min,孵育过程避免频繁开启孵育箱门。
撕掉封板膜,倒净孔内废液,洗涤液加满每孔浸泡 40s 后甩干,重复洗板 5 次,彻底清除游离杂质。
每孔加入显色底物液 100μL,避光 37℃显色 8min,严格控制显色时间避免过深。
加入终止液 50μL 终止酶促反应,混匀后 450nm 波长读取 OD 值,依据标准曲线完成定量检测。
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