本试剂盒采用间接ELISA检测原理,微孔板预包被纯化的人卵透明带(ZP)抗原,待测样本中的抗透明带抗体可与固相ZP抗原特异性免疫结合,孵育后洗除游离与非特异性结合成分;加入酶标记抗人二抗与结合的aZP抗体精准结合,形成稳定的抗原-抗体-酶标二抗复合物;经洗板纯化后加入底物显色,显色深浅与样本中aZP抗体含量成正比,终止显色后检测吸光度,结合标准曲线定量测定抗体浓度。
基本参数:

产品名称:人抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒
英文名称:aZP ELISA Kit
货号:Y-E2730
规格:48T/96T
灵敏度:0.29AU/mL
检测范围:0.58AU/mL - 18.56AU/mL
反应时间:孵育 59min、31min,避光显色 13min
保存条件:整套试剂 2~8℃,稀释后的工作液不可留存至次日使用
显色系统:A/B 双液混合显色
检测波长:450nm
标准曲线绘制:非线性回归绘制标准曲线,换算样本抗体浓度
注意事项:不明原因不孕不育筛查指标,女性经期采血结果偏差较大,建议月经干净后采样
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

试剂盒室温平衡 24min,取出微孔板条,按需拆分使用,标注空白孔、阴性对照孔、阳性对照孔、待测样本孔。
样本经稀释后加入对应样本孔 74μL,阴阳性对照孔加入对照试剂 74μL,空白孔无加样。
一步法直接添加酶标记抗体工作液 74μL 至所有非空白孔,封板密封,水平震荡酶标板混匀液体。
37℃恒温孵育 53min,孵育箱内避免频繁开关门造成温度波动。
撕膜倒净废液,洗涤液灌满每孔浸泡 26s 甩干,重复洗板 4 次,吸水纸吸干微孔内部水分。
每孔分别滴加显色 A 液、B 液各 50μL,避光混匀,室温显色 15min。
加入终止液 50μL 终止显色,混匀后酶标仪 450nm 检测吸光度,参照标准曲线定量 aZP 抗体浓度。
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