人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)ELISA试剂盒

本试剂盒依托双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理，酶标板微孔预包被FSA特异性抗体，孵育过程中样本中的胚胎性硫糖蛋白抗原与抗体特异性结合，加入酶标记检测抗体形成免疫复合物，充分洗涤后进行底物显色，显色深浅与样本中FSA浓度成正比，通过标准曲线换算完成定量检测。
产品参数：

‌灵敏度：1.5 μg/L

检测范围：8μg/L～620μg/L

反应时间：37℃孵育 93min，二抗 45min，显色 14min，总 152min

保存条件：2～8℃避光密封，底物液避光保存

显色系统：TMB 双组份混合显色

检测波长：450nm，参比 630nm

标准曲线绘制：6 梯度标准品，线性回归绘制标准曲线

注意事项：腹水样本需稀释后检测，高浓度抗原易钩状效应
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

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实验操作流程：

预处理：试剂盒全部试剂室温回温 30min，稀释浓缩洗涤液，梯度稀释 FSA 标准品。

板孔加样：各微孔加入标准品、待测体液样本、空白对照 100μL。

一步法酶抗添加：每孔加入 HRP 标记 FSA 抗体 100μL，封板震荡 30s。

恒温结合孵育：37℃避光孵育 63min。

洗板操作：倒掉废液，洗液浸泡 35s 拍干，循环洗板 5 次。

避光显色：加入显色 A、B 液各 50μL，显色 16min。

终止检测：终止液终止显色，酶标仪 450nm 测定 OD 值，定量 FSA 抗原浓度。