本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理,酶标板预先包被人FcαRⅠ特异性单克隆抗体,待测样本中的靶标蛋白与固相抗体特异性结合,加入辣根过氧化物酶标记的对应检测抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体免疫复合物,洗涤去除未结合杂质,通过酶促底物显色反应产生特异性颜色变化,显色强度与样本中FcαRⅠ含量正相关,经吸光度检测和标准曲线换算实现定量检测。
产品参数:
产品名称 | 人免疫球蛋白A Fc段受体Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E007 |
英文名称 | FcαRⅠ Elisa Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:0.48 pg/mL
检测范围:3pg/mL~120pg/mL
反应时间:37℃样本孵育 70min,二抗 42min,显色 14min,合计 126min
保存条件:整体 2~8℃冷藏,终止液常温密闭存放
显色系统:TMB 双液混合显色
检测波长:450nm,参比 620nm
标准曲线绘制:7 点梯度,四参数 Logistic 回归建模
注意事项:洗板步骤每孔洗液加注量不少于 300μL,洗板不少于 5 次
储存与有效期:
未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
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实验操作流程:
样本制备:细胞裂解液样本 12000rpm 离心 15min 取上清,稀释待测样本;配制 CD89 标准品梯度浓度。
板孔点样:对应微孔加入标准品、待测样品、空白对照各 100μL,记录布局。
一步法酶抗添加:所有孔加入 HRP 标记 CD89 抗体 100μL,封板密封。
免疫孵育:37℃避光孵育 60min,完成抗原与双抗体夹心结合。
洗板除杂:弃液后洗涤液浸泡每孔 30s,倒扣拍干,重复洗板 5 次。
底物显色:加入 TMB 显色液,室温避光反应 17min。
终止定量:终止液终止反应,450nm 测吸光度,换算样本 FcαRⅠ 浓度。
关键字: 人免疫球蛋白A Fc段受体Ⅰ;FcαRⅠ/CD89;ELISA试剂盒;
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