本试剂盒依托经典双抗体夹心酶联免疫吸附原理,固相酶标板包被有CD23特异性捕获抗体,样本及标准品中的FcεRⅡ抗原可与抗体特异性结合,随后加入酶标记检测抗体形成夹心复合物,充分洗涤后加入显色底物,在酶的催化下生成有色产物,终止反应后检测各孔吸光度,根据标准曲线精准计算样本中FcεRⅡ的含量。
产品参数:
产品名称 | 人免疫球蛋白E Fc段受体Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E008 |
英文名称 | FcεRⅡ Elisa Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:0.22 ng/mL
检测范围:1.5ng/mL~180ng/mL
反应时间:封闭 25min,样本孵育 85min,酶标二抗 38min,显色 16min,总 164min
保存条件:未拆封 2-8℃,开封后 1 个月内用完,底物液避光单独存放
显色系统:HRP-TMB 显色,稀硫酸终止
检测波长:450nm 直接读数
标准曲线绘制:6 个标准浓度,线性拟合,复孔 CV 值控制在 12% 以内
注意事项:细胞上清样本需去除沉淀杂质,否则易造成非特异性吸附
试剂盒组成:
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
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实验操作流程:
预处理:浓缩洗涤液稀释至工作浓度,梯度稀释 CD23 标准品,待测样本室温融化混匀。
加样:微孔板各孔加入标准品、样本、空白液 100μL,杜绝交叉滴洒。
酶结合物添加:每孔加入酶标记 CD23 检测抗体 100μL,封板震荡 30s。
孵育结合:37℃恒温避光孵育 50min。
洗板:弃净孔内液体,洗液浸泡 35s 拍干,循环洗板 6 次。
显色:加入显色底物混合液,避光显色 15min。
终止检测:加终止液,450nm 测定 OD 值,标准曲线计算 CD23 含量。
关键字: 人免疫球蛋白E Fc段受体Ⅱ;FcεRⅡ/CD23;ELISA试剂盒;
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