本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测技术,酶标板预包被MAdCAM-1特异性单克隆抗体,待测样本中的黏膜地址素细胞黏附分子与固相抗体特异性结合,加入酶标记检测抗体形成稳定夹心复合物,洗涤去除非特异性结合杂质后进行酶促显色,显色强度对应靶蛋白浓度,通过标准曲线换算完成定量检测。
产品参数:
产品名称 | 人黏膜地址素细胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E023 |
英文名称 | MAdCAM-1 Elisa Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:0.58 ng/L
检测范围:5ng/L~330ng/L
反应时间:封闭 32min,样本 86min,二抗 47min,显色 15min,总 180min
保存条件:未开封 2-8℃,开封后 2 个月内用完试剂盒
显色系统:A/B 底物混合后显色
检测波长:450nm 单波长读数
标准曲线绘制:6 点梯度,线性回归绘制标准曲线
注意事项:细胞培养上清需去除悬浮细胞沉淀再上样
试剂盒组成:
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
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实验操作流程:
准备工作:试剂盒组分室温回温,稀释浓缩洗涤液,梯度稀释 MAdCAM-1 标准品。
微孔加样:标准孔、样本孔、空白孔分别加样 100μL,标记孔位信息。
一步共孵加酶抗:每孔加入酶标特异性抗体 100μL,封板轻摇酶标板。
恒温孵育:37℃避光孵育 59min。
洗板去污:倒掉废液,洗液浸泡 25s 拍干,洗板 4 次。
避光显色:加入显色 A、B 液各 50μL,显色 16min。
终止定量:终止液终止反应,450nm 测定 OD 值,定量 MAdCAM-1 表达量。
关键字: 人黏膜地址素细胞黏附分子;MAdCAM-1;ELISA试剂盒;
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