人糖基化依赖的细胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA试剂盒

本试剂盒依托双抗体夹心ELISA检测原理，将高特异性的人GlyCAM-1抗体包被于酶标板表面，待测样本中的GlyCAM-1分子可与固相抗体特异性结合，经洗板去除非特异性结合物，加入酶标记配对抗体形成稳定的三元免疫复合物，催化底物显色后，颜色强度与样本中GlyCAM-1含量呈正比，通过酶标仪检测吸光度，结合标准曲线即可定量检测样本中该黏附分子的表达水平。
基本参数‌：

产品名称：人糖基化依赖的细胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA试剂盒

英文名称：GlyCAM-1   Elisa Kit
货号：Y-E016

规格：48T/96T

灵敏度：最低可测 0.07ng/mL

检测范围：0.13～11ng/mL

反应时间：封闭 35min，样本 37℃孵育 95min，二抗 50min，显色 14min

保存条件：包被板条带干燥剂密封 2～8℃，其余试剂同温保存

显色系统：A 液显色基质 + B 液催化液双组份显色

检测波长：450nm 为主，620nm 扣除背景

标准曲线绘制：采用四参数 Logistic 模型拟合，强制原点校正基线

注意事项：洗板每孔浸泡 30s 再拍干，洗涤不充分会造成本底偏高
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

试剂盒室温回温 32min，取出 GlyCAM-1 捕获抗体包被板，弃净孔内液体，洗板 1 次后拍干微孔。

区分空白孔、标准品孔、待测样本孔；标准品孔添加梯度标准品 60μL，样本孔加入细胞上清稀释液 60μL，空白孔补稀释缓冲液。

每孔加入 HRP 标记二抗 60μL，封板密封，37℃湿盒孵育 75min。

去封板，倾倒废液，洗涤液浸泡每孔 40s 弃除，连续洗板 5 次，倒置拍干。

配制显色工作液每孔加 100μL，37℃避光显色 13min。

每孔加注终止液 50μL，震荡混匀终止显色。

酶标仪 450nm 测 OD 值，拟合标准曲线定量 GlyCAM-1 表达量。
公司正在出售的产品：