本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理,酶标板微孔固定VCL特异性单克隆抗体,待测样本中的纽蛋白与固相抗体特异性结合,加入酶标记配对抗体形成夹心免疫结构,洗涤去除游离杂质后催化底物显色,终止后检测吸光度,结合标准曲线定量测定样本中VCL的含量。
产品参数:
产品名称 | 人纽蛋白(VCL)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E2570 |
英文名称 | VCL ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:0.68 pg/mL
检测范围:3pg/mL~102pg/mL
反应时间:封闭 31min,样本 83min,酶结合物 41min,显色 16min,总 171min
保存条件:2~8℃避光,洗涤浓缩液室温存放
显色系统:A/B 底物混合显色,稀硫酸终止
检测波长:450nm+600nm 双波长校正
标准曲线绘制:8 点梯度浓度,非线性拟合标准曲线
注意事项:贴壁细胞裂解前弃去培养基,避免培养基蛋白干扰
储存与有效期:
未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
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实验操作流程:
样本前处理:细胞裂解液高速离心去除残渣,稀释待测样本;梯度稀释 VCL 标准品溶液。
板孔点样:各微孔依次加入标准品、待测样本、空白对照液 100μL。
酶标抗体共加:每孔加入酶标记抗 VCL 抗体 100μL,封板密封。
孵育反应:37℃避光孵育 64min。
洗板除杂:弃净孔内液体,洗液浸泡 40s 拍干,洗板 5 次。
避光显色:加入显色混合底物,室温显色 14min。
终止检测:终止液终止反应,450nm 测定吸光度,计算 VCL 蛋白表达量。
关键字: 人纽蛋白;VCL;ELISA试剂盒;
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