本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理,微孔板包被抗人酪氨酸激酶2(Tyk-2)特异性单克隆抗体,待测样本中的Tyk-2蛋白与固相抗体结合,孵育洗涤后加入酶标记配对检测抗体,形成稳定免疫夹心复合物,底物显色后测定吸光度,结合标准曲线精准定量Tyk-2含量。
产品参数:
产品名称 | 人酪氨酸激酶2(Tyk-2)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E946 |
英文名称 | Tyk-2 Elisa Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最小检出 0.2 ng/mL
检测范围:0.1 ng/mL ~ 6.4 ng/mL
反应时间:样本温育 71min,二抗 36min,显色 15min
保存条件:试剂盒 2~8℃存放,浓缩试剂使用前颠倒混匀无沉淀
显色系统:双组份 TMB 显色,酸性终止液终止
检测波长:450nm
标准曲线绘制:软件导入标准品吸光度数值自动生成标准曲线换算浓度
注意事项:细胞裂解液样本需去除核酸沉淀后再检测
通用注意事项:
样本要求
血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸;组织匀浆充分离心去除沉淀;样本分装冻存,反复冻融≥3 次会导致抗原降解,检测值偏低。
温度控制
孵育温度严格 37℃,温箱温度波动、室温过低会降低结合效率,背景升高、重复性变差。
避光操作
TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化,显色全程避光,试剂避光存放。
洗板规范
洗涤不充分会造成高背景、假阳性;拍干时使用干净吸水纸,禁止交叉污染微孔。
污染防控
实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶;枪头一次性更换,标准品与样本避免交叉加样;底物液变色、出现沉淀不可使用。
安全防护
终止液含稀硫酸,具有腐蚀性,避免接触皮肤、黏膜;实验废液集中收集中和后处理,不可直接倾倒。
失效判定
试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异,均判定失效,禁止继续实验。
稀释校正
样本 OD 值高于最高标准孔时,必须稀释重测,最终结果乘以稀释倍数;低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。
空白对照
空白孔吸光度应极低,若空白孔 OD>0.1,说明洗涤不充分或试剂污染,实验作废重做。
储存禁忌
试剂盒不可冷冻结冰,冷冻会造成酶标抗体蛋白变性,直接导致试剂盒完全失效。
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实验操作流程:
试剂室温复温 22min,按需截取板条并标注孔位信息。
加样孔加入标准品或待测样本 50μL,同步添加酶标记液 50μL,封板封口。
摇匀板面液体,37℃孵育 53min。
弃去孔内液体,洗液浸泡 23s,拍干,洗板 4 次。
显色底物 A、B 各 50μL,避光显色 10min。
终止液 50μL 每孔添加混匀终止。
450nm 波长检测吸光度,得到 Tyk-2 检测结果。
关键字: 人酪氨酸激酶2;Tyk-2;ELISA试剂盒;
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