本试剂盒运用双抗体夹心ELISA检测原理,酶标板微孔包被抗人切除修复交叉互补基因1蛋白特异性抗体。样本中的ERCC1蛋白与固相抗体特异性结合,孵育洗涤后加入辣根过氧化物酶标记二抗,形成免疫复合物,后续经底物显色、终止反应,检测吸光度数值,结合标准曲线可定量检测样本中ERCC1蛋白的表达水平。
产品参数:
产品名称 | 人切除修复交叉互补基因1(ERCC1)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E2940 |
英文名称 | ERCC1 ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最小检出 0.065ng/mL
检测范围:0.2ng/mL~12.8ng/mL
反应时间:加样孵育 61min,二抗孵育 49min,避光显色 16.5min
保存条件:2~8℃冷藏;标准品溶解后一次性使用,不可回收留存
显色系统:HRP-TMB 一步显色体系
检测波长:450nm 主波长,620nm 参比
标准曲线绘制:四参数 Logistic 拟合,自动扣除空白孔本底
注意事项:核酸蛋白样本避免核酸酶污染,防止靶蛋白结构破坏影响结合
关键注意事项:
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
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实验操作流程:
试剂室温复温 30min,稀释浓缩洗涤液;固定酶标板框架,区分三组孔位。
标准品孔上样梯度稀释 ERCC1 标准品 50μL,样本孔加入预处理待测样本 50μL,空白孔无添加。
加样孔加入一步法酶标记检测抗体 100μL,封板轻晃混匀孔内体系。
37℃避光孵育 64min,稳定温度环境。
洗板 5 次,每次洗涤液浸泡 34s,甩干后吸水纸彻底拍干。
依次加入显色底物 A、B 各 50μL,避光 37℃显色 18min。
加入终止液终止反应,450nm 检测 OD 值,拟合标准曲线定量 ERCC1 蛋白含量。
关键字: 人切除修复交叉互补基因1;ERCC1;ELISA试剂盒;
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