本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附原理,预先将抗人HLA-C特异性抗体包被于微孔板固相载体,待测样本中的人类白细胞抗原C(HLA-C)与固相抗体特异性结合,洗涤后加入酶标记配对抗体形成夹心复合物,底物显色终止后检测吸光度,结合标准曲线完成定量检测。
产品参数:
产品名称 | 人类白细胞抗原C(HLA-C)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E2774 |
英文名称 | HLA-C ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:检出下限 0.35 ng/mL
检测范围:0.2 ng/mL ~ 12.8 ng/mL
反应时间:孵育 91min,酶标抗体 53min,显色 20min
保存条件:2~8℃冷藏,洗涤液按比例稀释,不可随意更改配比
显色系统:单液型 TMB 显色体系
检测波长:450nm/630nm 双波长读数
标准曲线绘制:软件自动生成标准曲线,计算样本 HLA-C 表达含量
注意事项:试剂盒不同批次不能混用,每批次需重新做标准曲线
关键注意事项:
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
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实验操作流程:
试剂盒室温放置 36min,取出酶标板,设置梯度标准孔、阴性阳性对照孔、待测样本孔。
每孔加入标准品或稀释待测样本 50μL,紧接着加入酶结合工作液 50μL,封板覆膜密封。
手动震荡混匀板面,37℃孵育 69min。
撕开封板弃净液体,洗涤液浸泡 39s,吸水纸反复拍干,洗板 6 次。
显色液 A、B 每孔各 50μL,避光 37℃显色 19min。
每孔加入终止液 50μL,充分摇晃终止显色反应。
酶标仪 450nm 测定各孔 OD 值,绘制标准曲线计算 HLA-C 浓度。
关键字: 人类白细胞抗原C;HLA-C;ELISA试剂盒;
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