本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附原理，固相微孔板包被人亲环素B(CyPB)特异性抗体，加入待测样本与梯度标准品，样本中的CyPB抗原与固相抗体特异性结合，孵育洗涤后加入酶标记二抗形成稳定免疫复合物，底物发生酶促显色反应后终止，检测吸光度值，数值与样本中CyPB含量呈线性正相关，可准确测定样本靶标浓度。
基本参数：
产品名称：人嗜环蛋白/亲环素B(CyPB)ELISA试剂盒
英文名称：CyPB ELISA Kit
货号：Y-E2761
规格：48T/96T
灵敏度：检出限 2.7pg/mL
检测范围：16pg/mL ~ 720pg/mL
反应时间：样本孵育 79min，酶结合物 55min，底物显色 20min，合计 2h34min
保存条件：试剂盒主体 2～8℃避光，终止液常温存放无避光要求，洗涤液结晶温水溶解
显色系统：A、B 显色液依次添加混匀终止前避光
检测波长：450nm 搭配 650nm 双波长校正
标准曲线绘制：五参数 Logistic 拟合曲线，6 组梯度标准品
注意事项：肝素抗凝血浆适配检测，枸橼酸钠抗凝样本本底偏高不建议使用
关键注意事项：
本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。
终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。
终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：
所有组分室温平衡 32min，稀释洗涤缓冲液，逐级稀释 CyPB 标准品，拆分酶标板多余板条密封冷藏。
标准品孔加 50μL 梯度 CyPB 标准溶液；样本孔加 42μL 稀释液 + 8μL 样本；空白孔不加试剂。
除空白孔外每孔加入 HRP 标记抗体 100μL，封板 37℃孵育 69min。
倒掉孔内废液，洗涤液浸泡 40s 甩干，洗板 6 次，充分拍干微孔板。
每孔添加显色双底物液各 50μL，轻震混匀，37℃避光显色 17min。
加入终止液 50μL 混匀终止酶促显色。
酶标仪 450nm 读值，依据标准曲线定量 CyPB 浓度。
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