本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附原理,酶标板预先包被靶向人GOT/GPT的特异性抗体,待测样本中的转氨酶与固相抗体特异性结合,洗板去除非特异性结合成分后,加入辣根过氧化物酶标记二抗形成稳定免疫复合物,再次洗板后启动底物显色反应,终止显色后检测吸光度数值,依据标准曲线可精准计算样本中GOT/GPT的表达含量。
基本参数:

产品名称:人天门冬氨酸转氨酶/谷草转氨酶(GOT/GPT)ELISA试剂盒
英文名称:GOT/GPT Elisa Kit
货号:Y-E347
规格:48T/96T
灵敏度:最低检出 0.12U/L
检测范围:3~250U/L
反应时间:封闭 20min,样本孵育 65min,显色 19min
保存条件:试剂 2~8℃冷藏,终止液常温密封保存
显色系统:HRP 介导 TMB 显色反应
检测波长:450nm 单波长测定
标准曲线绘制:六组标品梯度,Origin 拟合标准曲线方程
注意事项:样本避免反复冻融 3 次以上,酶活性会大幅衰减
关键注意事项:

本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
实验步骤如下:

试剂盒室温放置 28min,取出 GOT/GPT 双靶标包被板,弃净孔内液体,洗涤液清洗微孔 2 次,拍干。
设定空白孔、梯度标准品孔、待测体液样本孔;标准品孔加入混合标准品 55μL,样本孔加入稀释待测液 55μL,空白孔补稀释液。
每孔加入酶标记复合抗体 55μL,封板膜封闭,37℃孵育 70min。
掀开封板,倾倒废液,洗涤液注孔浸泡 40s 丢弃,洗板 5 次,充分拍干微孔。
每孔添加显色混合底物 100μL,遮光条件下显色 12min。
每孔加注终止液 50μL,混匀终止底物反应。
450nm 酶标仪检测 OD 值,绘制曲线计算 GOT/GPT 数值。
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