本试剂盒采用酶联免疫吸附夹心检测原理,酶标板微孔固定抗人DUTP特异性抗体,加入待测样本后,样本中的脱氧尿三磷酸与固相抗体特异性结合,洗涤纯化反应体系,加入酶标记配对二抗形成三元免疫复合物,再次洗板后加入底物显色,显色深浅与样本DUTP含量呈正相关,通过检测吸光度并对照标准曲线,可定量检测样本中脱氧尿三磷酸的浓度。
基本参数:

产品名称:人脱氧尿三磷酸(DUTP)ELISA试剂盒
英文名称:DUTP ELISA Kit
货号:Y-E2612
规格:48T/96T
灵敏度:≤0.15μmol/L
检测范围:0.3~20μmol/L
反应时间:样本孵育 62min,酶结合物 41min,显色 23min
保存条件:试剂盒 2~8℃,浓缩洗涤液室温储存
显色系统:HRP 催化 TMB 显色,稀盐酸终止反应
检测波长:450nm 为主波长,630nm 参比
标准曲线绘制:线性回归拟合,高值样本需稀释后重测
注意事项:样本避免核酸降解,提取后尽快分装冻存
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

试剂盒室温放置 30min,DUTP 特异性包被板去除封存液,洗涤缓冲液洗板 2 次,倒扣拍干微孔。
设立空白孔、系列标准品孔、细胞核酸提取样本孔;标准品孔加入梯度 DUTP 标准品 50μL,样本孔加入稀释提取液 50μL,空白孔加稀释液。
每孔加入 HRP 标记抗体液 50μL,覆膜封板,37℃恒温孵育 66min。
倒掉孔内反应废液,洗涤液浸泡每孔 35s 弃除,洗板 4 次,吸水纸彻底拍干。
每孔加入显色底物混合液 100μL,避光室温显色 13min。
加入终止液 50μL 混匀终止显色。
450nm 读取 OD 数值,绘制标准曲线计算 DUTP 含量。
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