本试剂盒运用双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理,酶标板固定抗人CpG-ODN特异性抗体,加入待测样本后,样本中的未甲基化寡聚脱氧核苷酸与固相抗体特异性结合,洗涤纯化反应体系,加入酶标记二抗形成免疫复合物,洗除游离标记物后加入底物显色,终止反应后检测吸光度,依据标准曲线精准定量样本中CpG-ODN的含量。
基本参数:

产品名称:人未甲基化寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)ELISA试剂盒
英文名称:CpG-ODN ELISA Kit
货号:Y-E2618
规格:48T/96T
灵敏度:≤0.18nmol/L
检测范围:0.3~22nmol/L
反应时间:样本孵育 95min,酶结合物 65min,显色 24min
保存条件:试剂盒 2~8℃,浓缩洗涤液室温可放置 2 个月
显色系统:酸性终止 TMB 显色体系
检测波长:450nm 单波长读数
标准曲线绘制:线性拟合标准曲线,低浓度样本放大读数计算
注意事项:实验耗材无 DNase/RNase 污染,防止核酸模板降解
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

试剂盒室温平衡 32min,CpG-ODN 特异性包被板弃封存液,洗板 2 次后拍干微孔残留液体。
划分孔位:空白孔、倍比标准品孔、细胞上清样本孔;标准品孔加入 CpG-ODN 标准品 50μL,样本孔加入稀释待测液 50μL,空白孔补稀释液。
每孔加入酶标二抗 50μL,封板密封,37℃孵育 68min。
掀开封板膜,倾倒废液,洗涤液浸泡每孔 30s 弃除,洗板 6 次,彻底拍干。
每孔添加显色底物液 100μL,避光 37℃显色 15min。
滴加终止液 50μL 混匀终止显色反应。
酶标仪 450nm 读数,标准曲线定量 CpG-ODN 含量。
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