本试剂盒基于竞争法ELISA检测原理,微孔板固相包被硫酸褪黑色素抗原,样本中的人硫酸褪黑色素与固相抗原竞争结合酶标特异性抗体,孵育洗涤后显色,吸光度值随MS含量升高而降低,通过标准曲线换算可定量检测样本中MS的含量。
产品参数:
产品名称 | 人硫酸褪黑色素(MS)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E656 |
英文名称 | MS Elisa Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:≤12pg/mL
检测范围:40pg/mL–650pg/mL
反应时间:避光孵育总时长 162min
保存条件:全程 2–8℃严格避光,褪黑素类试剂极易见光分解
显色系统:单组份 TMB 显色液
检测波长:450nm,参比 620nm
标准曲线绘制:对数拟合标准曲线用于样本浓度换算
注意事项:样本采集全程避光操作,避免自然光破坏待测物
通用注意事项:
样本要求
血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸;组织匀浆充分离心去除沉淀;样本分装冻存,反复冻融≥3 次会导致抗原降解,检测值偏低。
温度控制
孵育温度严格 37℃,温箱温度波动、室温过低会降低结合效率,背景升高、重复性变差。
避光操作
TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化,显色全程避光,试剂避光存放。
洗板规范
洗涤不充分会造成高背景、假阳性;拍干时使用干净吸水纸,禁止交叉污染微孔。
污染防控
实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶;枪头一次性更换,标准品与样本避免交叉加样;底物液变色、出现沉淀不可使用。
安全防护
终止液含稀硫酸,具有腐蚀性,避免接触皮肤、黏膜;实验废液集中收集中和后处理,不可直接倾倒。
失效判定
试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异,均判定失效,禁止继续实验。
稀释校正
样本 OD 值高于最高标准孔时,必须稀释重测,最终结果乘以稀释倍数;低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。
空白对照
空白孔吸光度应极低,若空白孔 OD>0.1,说明洗涤不充分或试剂污染,实验作废重做。
储存禁忌
试剂盒不可冷冻结冰,冷冻会造成酶标抗体蛋白变性,直接导致试剂盒完全失效。
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实验操作流程:
样本预处理:血浆样本避光采集离心,全程避光稀释;
避光加样:弱光条件下每孔加入标准品、待测避光样本 100μL;
避光共孵:直接添加酶结合工作液,避光封板 37℃孵育 75min;
避光洗板:洗涤液浸泡 35s,拍干,洗板 4 次;
全程避光显色:避光孵育 21min;
终止反应:弱光下加入终止液混匀;
避光快速读数:酶标仪检测,计算 MS 褪黑色素硫酸盐含量。
关键字: 人硫酸褪黑色素;MS;ELISA试剂盒;
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