本试剂盒采用双夹心ELISA免疫检测原理,固相酶标板包被人SNAI2特异性抗体,可特异性捕获待测样本中的蜗牛同源物2蛋白,孵育结合后洗涤去除体系杂质,加入酶标记二抗形成稳定免疫复合物,充分反应洗板后加入底物显色,终止显色后检测吸光度,结合标准曲线即可定量检测样本中SNAI2蛋白的表达含量。
基本参数:

产品名称:人蜗牛同源物2(SNAI2)ELISA试剂盒
英文名称:SNAI2 ELISA Kit
货号:Y-E2955
规格:48T/96T
灵敏度:最低检出 0.06ng/mL
检测范围:0.12~10.2ng/mL
反应时间:室温孵育 86min,酶标二抗 53min,避光显色 16min
保存条件:试剂盒 2~8℃冷藏,开盖试剂单次取用快速封口
显色系统:改良 TMB 增强显色体系
检测波长:450nm+600nm 双波长读数
标准曲线绘制:7 组梯度标品,R²>0.996 方可判定曲线有效
注意事项:组织裂解液需去除核酸沉淀,杂质会堵塞包被位点
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

试剂盒室温平衡 29min,SNAI2 包被微孔板去除孔内保护液,洗涤缓冲液洗板 2 次,吸水纸拍干备用。
设立空白孔、梯度标准孔、肿瘤组织蛋白样本孔;标准品孔加入 SNAI2 标准品 50μL,样本孔加入稀释裂解蛋白液 50μL,空白孔添加稀释缓冲液。
每孔加入 HRP 标记检测抗体 50μL,覆膜封板,37℃孵育 58min。
倒掉孔内反应液体,洗板液浸泡每孔 30s 弃除,洗板 6 次,彻底拍干微孔。
每孔加入显色底物液 100μL,避光 37℃显色 17min。
滴加终止液 50μL,轻摇酶标板终止显色。
450nm 波长测吸光度,计算 SNAI2 转录因子蛋白浓度。
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