本试剂盒依托双抗体夹心ELISA检测技术,酶标板预先包被人ACO-2特异性抗体,样本中的乌头酸酶2与固相抗体特异性结合,孵育完成抗原抗体反应后洗除游离组分,加入HRP标记二抗构建免疫复合物,再次洗板纯化体系后加入底物显色,显色强度与ACO-2含量成正比,通过吸光度检测和标准曲线拟合实现精准定量。
基本参数:

产品名称:人乌头酸酶2(ACO-2)ELISA试剂盒
英文名称:ACO-2 Elisa Kit
货号:Y-E3043
规格:48T/96T
灵敏度:≤0.08U/L
检测范围:0.16~42U/L
反应时间:37℃孵育 70min,二抗 42min,显色 15min
保存条件:所有试剂 2~8℃避光,终止液常温密封储存
显色系统:单瓶装 TMB 显色液,硫酸终止
检测波长:450nm 单波长测定吸光度
标准曲线绘制:线性拟合标准曲线,直接换算酶活力单位
注意事项:样本避免金属离子污染,铁离子会干扰乌头酸酶活性检测
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

试剂盒室温放置 32min,ACO-2 抗体包被板弃孔内液体,洗涤液洗板 1 次后倒扣拍干微孔。
区分空白对照、倍比标准品、线粒体提取样本孔;标准品孔加入 ACO-2 标准品 60μL,样本孔加入稀释线粒体上清 60μL,空白孔补稀释液。
每孔加入酶结合抗体 60μL,封板密封,37℃湿盒孵育 70min。
掀开封板膜倾倒废液,洗涤液浸泡每孔 35s 弃液,洗板 5 次,用力拍干微孔水分。
配制显色工作液每孔加 100μL,室温避光显色 12min。
每孔加注终止液 50μL 混匀终止底物反应。
450nm 酶标仪读数,拟合标准曲线测定 ACO-2 含量。
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关键字: 人乌头酸酶2;ACO-2;ELISA试剂盒;
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