本试剂盒采用特异性抗原抗体结合的ELISA检测原理,酶标板预先包被SLE相关特异性抗原,待测样本中的SLE相关自身抗体可与固相抗原特异性结合,洗涤去除非特异性结合物质后,加入酶标记二抗形成免疫复合物,经底物显色、终止反应后,检测吸光度数值,结合标准曲线定量分析样本中SLE相关抗体的表达水平。
基本参数:

产品名称:人系统性红斑狼疮(SLE)ELISA试剂盒
英文名称:SLE Elisa Kit
货号:Y-E408
规格:48T/96T
灵敏度:最低检出 0.1AU/mL
检测范围:0.25~60AU/mL
反应时间:样本孵育 98min,二抗 61min,避光显色 23min
保存条件:全套试剂 2~8℃避光存放,洗涤浓缩液室温可稀释配制
显色系统:增强型 TMB 显色,酸性终止液终止反应
检测波长:仅 450nm 检测吸光值
标准曲线绘制:阴阳质控孔划定 Cutoff 值,半定量标准曲线换算滴度
注意事项:多种自身抗体交叉干扰,结果需结合多项自身抗体指标综合判读
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

试剂盒全部组分室温回温 30min,SLE 多抗原复合包被板弃孔内液体,洗板 1 次后拍干微孔。
设立空白孔、阳性梯度参照孔、患者血清样本孔;标准参照孔加入 SLE 阳性对照品 60μL,样本孔加入预处理稀释血清 60μL,空白孔补稀释液。
每孔加入酶标记抗人二抗 60μL,封板膜封闭,37℃湿盒孵育 73min。
掀开封板倾倒废液,洗涤液浸泡每孔 40s 弃除,连续洗板 5 次,吸水纸用力拍干微孔。
每孔加入显色混合底物 100μL,避光室温显色 13min。
每孔加注终止液 50μL 混匀终止反应。
450nm 酶标仪检测数值,对照阈值判定 SLE 相关自身抗体水平。
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