短螺旋体通用PCR检测试剂盒 新品

本试剂盒为短螺旋体属通用型检测产品，靶向短螺旋体属细菌保守核酸序列，可广谱检测各类动物源致病短螺旋体核酸，适配猪、牛、禽等多种畜禽的肠道组织、粪便样本。试剂盒通用性强、适用范围广，检测快速、结果精准，可快速甄别短螺旋体属病原菌感染。适用于各类畜禽肠道短螺旋体疫病的初步筛查、属类鉴别、养殖环境病原菌监测及畜牧疫病流行病学调研。

基础原理：

基于所有短螺旋体属保守 16S rRNA 基因设计通用引物，qPCR 广谱检出各类动物源短螺旋体。

通用普通 PCR 扩增螺旋体鞭毛蛋白保守基因，任意短螺旋体核酸均可扩增出特异性条带。

通用染料法荧光 PCR，通过统一熔解曲线判定样本含短螺旋体属细菌，后续可分型鉴定。

‌操作步骤‌：

1. 样本处理

提取待测样本RNA，建议使用商品化RNA提取试剂盒。

2. 阳性对照稀释（示例：6个梯度）

标记离心管（7至2号），每管加入45μL模板稀释液。

按10倍梯度稀释阳性对照，避免交叉污染。

3. PCR反应体系配制（20μL/反应）

| 组分 | 体积（μL） |

| RT-PCR反应液 | 10 |

| 荧光染料 | 0.5 |

| 引物混合液 | 2 |

| RNA模板 | 2 |

| RNase-free水 | 补至20 |

4. 上机程序

逆转录：50℃ 15分钟（可选，根据病毒RNA特性调整）。

预变性：95℃ 2分钟。

循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号），共40循环。

‌注意事项‌：

避免反复冻融试剂，解冻后需充分混匀。

实验环境需严格分区（试剂准备区、样本处理区、扩增区），防止污染。

阳性对照需与样本分装操作。

本产品仅限科研用途，不可用于临床诊断。

操作时需穿戴防护装备，避免试剂接触皮肤或眼睛。

样本采集需遵循无菌原则，运输时使用干冰或冰袋保存。

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