滤纸酶测试盒
产品介绍：
纤维素酶是由微生物产生的多组分的酶系，能水解纤维素β-1,4葡萄糖苷键生成葡萄糖，滤纸酶是其中的一个组分，研究滤纸酶活力对纤维素酶的研究具有非常重要的意义。
测定原理
滤纸酶水解滤纸产生的还原糖能与3,5-二硝基水杨酸生成红棕色氨基化合物，在540nm处有最大光吸收，在一定范围内反应液颜色深浅与还原糖的量成正比，可测定计算得滤纸酶的活力。
自备实验用品及仪器
天平、研钵、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。
产品名称 | 滤纸酶测试盒 |
规格 | 100管/48样、50管/24样 |
检测方法 | 微量法、可见分光光度法 |
分类 | 糖代谢系列 |
货号 | YSH3360 |
检测原理：
反应原理：纤维素酶混合物水解滤纸（天然纤维素底物），水解产生葡萄糖等还原糖；DNS 法测定生成还原糖的量。
检测依据：540nm 下还原糖显色产物吸光度与滤纸被水解程度正相关；滤纸酶活代表纤维素酶系统总体降解能力。
显色 / 信号机制：滤纸多糖链被酶切割，释放可溶性还原糖；还原糖高温碱性还原 DNS 显色。
计算原理：葡萄糖标准曲线定量产物；酶活单位定义：每小时水解滤纸产生 1mg 葡萄糖所需酶量为一个滤纸酶活力单位。
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操作步骤：
比色法/分光光度法/微量法操作仪器预热：可见分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长到500nm/550nm，蒸馏水调零试剂配制：
试剂二：临用前加入1.5mL蒸馏水充分溶解备用
试剂三：临用前加入1.5mL蒸馏水充分溶解备用样本测定：
试剂名称(μL) 空白管 测定管
蒸馏水/样本 100 100
试剂一 700 700
试剂二 100 100
试剂三 100 100
混匀后37℃水浴10min，记录500nm/550nm处的吸光值A空白和A测定标准曲线绘制：将PLD标准品稀释成0、1、2、3、4、5U/L系列浓度，同样处理，测定500nm/550nm处的吸光值，绘制标准曲线
ELISA法操作试剂准备：将试剂盒从冷藏环境中取出，室温平衡15-30分钟；将20×洗涤缓冲液用蒸馏水20倍稀释后备用加样：
从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃
设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加温育：除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入HRP标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min洗涤：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）显色：每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min终止：每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值结果计算：绘制标准曲线，按曲线方程计算样本浓度
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