产品简介
Anti-FITC抗体FITC(Fluorescein‑5‑isothiocyanate,异硫氰酸荧光素)是常用绿色荧光标记染料。Anti‑FITC 抗体可特异性识别结合 FITC 基团,不依赖 FITC 所偶联的抗原分子;常用于放大 FITC 荧光信号、免疫组化信号增强、流式细胞术、斑点实验,捕获 FITC 标记探针等实验。
免疫原
FITC‑载体蛋白偶联物。
抗体亚型
- 多克隆:兔 IgG / 山羊 IgG
- 单克隆:小鼠 IgG(常见 IgG1、IgG2a)
反应特异性
特异性识别游离及蛋白 / 核酸偶联的 FITC 基团;与 TRITC、Cy 系列、Alexa 荧光染料无明显交叉反应。无物种种属限制,靶标为荧光基团,不是生物蛋白抗原。
建议工作稀释比例
| 实验方法 | 推荐起始稀释 |
| --- | --- |
| Western Blot | 1:2000‑1:10000 |
| 免疫组化 IHC‑P / IHC‑F | 1:200‑1:2000 |
| 免疫荧光 IF/ICC | 1:500‑1:3000 |
| 流式细胞术 | 1:100‑1:1000 |
| ELISA | 1:5000‑1:20000 |
| 原位杂交信号放大 | 1:100‑1:800 |
制剂与组分
- 抗体形式:纯化 IgG;部分为亲和纯化抗体
- 缓冲体系:PBS,pH7.2‑7.4;可含有稳定剂;部分制剂含 0.02% 叠氮钠作为防腐剂
- 浓度:0.5‑1 mg/mL
储存条件
1. 短期:2‑8 ℃保存,可存放 1 个月。
2. 长期:分装后‑20 ℃避光保存,避免反复冻融。
实验注意事项
1. 该抗体识别 FITC 荧光基团,不是抗样本内源蛋白抗体,样本本身必须预先使用 FITC 标记。
2. 信号放大实验:一抗 FITC 标记,再使用本抗体(二抗标记 HRP、AP、其他荧光)实现信号放大,提升弱信号检出。
3. 避免强光照射,FITC 本身易光漂白,全程尽量避光操作。
4. 叠氮钠会抑制过氧化物酶活性,做 HRP 体系时选用无叠氮钠版本。
5. 建议设置对照:①不加 FITC 标记样本的阴性对照;②不加一抗只加 Anti‑FITC 抗体的空白对照,排除非特异性结合。
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关键字: Anti-FITC抗体;
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